Морфо-функціональна характеристика культивованих клітин, виділених з нігтьового органу миші [Текст] = Morphological and functional characteristics of cell culture derived from the mouse nail unit / О. О. Калмикова [та ін.] // Клітинна та органна трансплантологія. - 2017. - Том 5, N 1. - С. 56-67. - Бібліогр.: в кінці ст. MeSH-головна: НОГТИ -- NAILS (анатомия и гистология, цитология) МОДЕЛИ НА ЖИВОТНЫХ -- MODELS, ANIMAL МЫШИ ИНБРЕДНЫХ ЛИНИЙ -- MICE, INBRED STRAINS (анатомия и гистология) КЕРАТИНОЦИТЫ -- KERATINOCYTES (ультраструктура) ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ-ПРЕДШЕСТВЕННИКИ -- ENDOTHELIAL PROGENITOR CELLS (цитология) МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ -- MORPHOLOGICAL AND MICROSCOPIC FINDINGS МИКРОМАТРИЧНЫЕ АНАЛИЗЫ -- MICROARRAY ANALYSIS (методы, тенденции) Анотація: Нігтьовий орган є складною анатомічною структурою, яка здатна до росту та швидкої регенерації протягом усього життя організму. Такий значний відновлювальний потенціал пов’язують з наявністю в ньому стовбурових та прогеніторних клітин різного типу, біологія яких залишається одним із відкритих на сьогодні фундаментальних питань. Враховуючи активні пошуки нових джерел стовбурових клітин для клітинної терапії, актуальним є розгляд нігтьової одиниці, як потенційного місця локалізації малодиференційованих клітин з стовбуровим потенціалом. Мета. Дослідження було спрямоване на встановлення морфологічних, морфометричних та проліферативних характеристик культивованих клітин, виділених з нігтьового органу миші. Матеріали та методи. Отримано первинні культури клітин з біоптатів, що включали області проксимальної нігтьової складки, матриксу та оніходермісу нігтьового органу мишей лінії FVB. Клітини культивували в середовищі DMEM:F12 з 15 % ембріональної сироватки корів протягом 6 пасажів. Визначали колонієутворюючу активність, швидкість подвоєння популяції, вимірювали площу клітин, ядер, розраховували ядерно-цитоплазматичний індекс. Для аналізу морфології клітин використовували фарбування гематоксиліном Бемера та еозином, залізним гематоксиліном Генденгайна та барвником Май-Грюнвальда. Результати. За даними морфологічного опису клітини з нігтьового органу мишей в культурі in vitro мають високу синтетичну активність та низьке ядерно-цитоплазматичне співвідношення – риси, характерні для малодиференційованих клітин. Час подвоєння популяції культури в середньому становив 80 ± 6,5 годин, найшвидше клітини росли на 4-му пасажі (63 ± 7 годин). Питома швидкість приросту культури в загальному є низькою (0,01 ± 0,0007). Ефективність колонієутворення на 5-му пасажі складала лише 4 %. Значна кількість колоній була малого розміру з великими проліферативно малоактивними клітинами, що може свідчити про виділення значної частини проміжних прогеніторних клітин. Висновки. Отримана культура клітин нігтьового органу за даними аналізу їх морфології, морфометрії та проліферативного потенціалу є досить гетерогенною і потребує подальшої розробки та застосування технологій селективного культивування для детальної характеристики окремих її субпопуляцій Nail unit is a complex anatomical structure that is capable of rapid growth and regeneration throughout the life. Such significant reparative potential is associated with the presence different types of stem and progenitor cells, whose biology remains one of the fundamental issues today. Taking into account the active search for new stem cell sources for cell therapy, the view of the nail unit as a potential site for the localization of undifferentiated cells with stem potency is topical problem. Purpose. The study was conducted with an objective to establish the morphological, morphometric and proliferative characteristics of cultured cells isolated from the mouse nail unit. Materials and methods. Primary cultures of cells were obtained from tissue sampling, which included areas of the proximal nail fold, nail matrix and onychodermis of the FVB mouse nail organ. Cells were cultured in DMEM:F12 medium with 15 % fetal bovine serum during 6 passages. We determined the colony-forming activity, the population growth rate and doubling time, measured the area of cells, nuclei, and calculated the nuclear-cytoplasmic ratio. For cell morphology analysis, we used staining with Bemer’s hematoxylin and eosin, Heidenhain’s iron hematoxylin and May-Grünwald stain. Results. According to the morphological analysis in vitro the cells from mouse nail unit are heterogeneous with high synthetic activity and a low nuclear-cytoplasmic ratio – the features characteristic of the low-differentiated cells. The population doubling time of the culture was 80 ± 6.5 hours on average, the fastest growing cells were at the 4th passage (63 ± 7 hours). The specific growth rate for cell culture is low (0.01 ± 0.0007). The colony forming efficiency at the 5th passage was only 4 %. A significant number of colonies was small with large poorly proliferative cells, which may indicate a production of large numbers of transitional progenitor cells. Conclusion. The obtained cell culture from the mouse nail unit according to the analysis of their morphology, morphometry and proliferative potential is heterogeneous and requires the further development of pure culture technologies for the detailed characterization of separate subpopulations of cells Дод.точки доступу: Калмикова, О. О. Устименко, А. М. Луценко, Т. М. Клименко, П. П. Кирик, В. М. Вільних прим. немає