Role of the heparin-binding domain in intracellular trafficking of sHB-EGF [Текст] = Роль гепаринзв’язувального домену у внутрішньо¬клітинному трафіку sHB-EGF / O. I. Krynina [та ін.] // The Ukrainian Biochemical Journal. - 2019. - Т. 91, № 4. - С. 26-32. - Bibliogr. at the end of the art. MeSH-головна: ГЕПАРИН-СВЯЗЫВАЮЩИЙ EGF-ПОДОБНЫЙ ФАКТОР РОСТА -- HEPARIN-BINDING EGF-LIKE GROWTH FACTOR (анализ, химия) ГЕННАЯ ЭКСПРЕССИЯ -- GENE EXPRESSION КЛЕТКИ ПРОЛИФЕРАЦИЯ -- CELL PROLIFERATION ЛИГАНД-РЕЦЕПТОРОВ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ПОНИЖАЮЩАЯ РЕГУЛЯЦИЯ -- DOWN-REGULATION РЕЦЕПТОР ЭПИДЕРМАЛЬНОГО ФАКТОРА РОСТА -- RECEPTOR, EPIDERMAL GROWTH FACTOR (анализ, химия) ЭНДОЦИТОЗ -- ENDOCYTOSIS (физиология) Анотація: Heparin-binding EGF-like growth factor (HB-EGF) is a member of the epidermal growth factor fami­ly that was proven as a potent mitogen and chemoattractant. HB-EGF mediated EGFR activation is a key event in the stimulation of gene expression, cell migration and proliferation during both normal and pathogenic physiological processes. The main goal of this research was to reveal the role of the heparin-binding domain of HB-EGF in the ligand-receptor formation and its further internalization to the cytoplasm. We used fluorescently-labeled recombinant derivative of soluble HB-EGF and its truncated form (sHB-EGF[[d]]Δ84–106[[/d]]) with deletion of the heparin-binding domain. Firstly, the binding kinetics of two forms of sHB-EGF to its cell surface receptors was determined using flow cytometry. To determine how the absence of heparin-binding domain in the structure of HB-EGF affects its internalization, we analyzed the endocytosis process of EGFP-sHB-EGF[[d]]Δ84–106[[/d]] and EGFP-sHB-EGF complexes by confocal microscopy. It was found that the full-size form of HB-EGF is characterized by a lower intensity of translocation to the cytoplasm in comparison to HBD-deleted form. Thus, differences in the trafficking of the full-size or truncated forms of sHB-EGF in the cell cytoplasm may reflect the mechanisms of extracellular matrix influence on the biological activity of sHB-EGF Гепаринзв’язувальний EGF-подібний фактор росту (HB-EGF) є представником сімейства епідермальних факторів росту, який є потужним мітогеном та атрактантом. HB-EGF-опосередкована активація EGFR є необхідною для стимуляції експресії генів, міграції та проліферації клітин як за нормальних, так і патогенних фізіологічних процесів. Основна мета цього дослідження полягала у визначенні ролі гепаринзв’язувального домену HB-EGF у процесі формування стабільного рецептор-лігандного комплексу та його подальшої інтерналізації до цитоплазми. Було використано флуоресцентно-мічене рекомбінантне похідне розчинного HB-EGF та його вкорочену форму (sHB-EGF[[d]]Δ84-106[[/d]]) з делецією гепаринзв’язувального домену. Спочатку, з використанням протокової цитофлуориметрії, було визначено кінетику зв’язування двох форм sHB-EGF до його рецепторів на поверхні клітин. Для дослідження впливу відсутності гепаринзв’язувального домену в структурі HB-EGF на його інтерналізацію проаналізовано процес ендоцитозу EGFP-sHB-EGF[[d]]Δ84-106[[/d]] та EGFP-sHB-EGF за допомогою конфокальної мікроскопії. Виявлено, що повнорозмірна форма HB-EGF характеризується меншою інтенсивністю транслокації до цитоплазми порівняно з вкороченою формою sHB-EGF. Таким чином, відмінності у транспортуванні повнорозмірної або вкороченої форми sHB-EGF до клітинної цитоплазми можуть відображати механізми впливу позаклітинного матриксу на прояв біологічної активності sHB-EGF Дод.точки доступу: Krynina, O. I. Manoilov, K. Yu. Kolybo, D. V. Komisarenko, S. V. Вільних прим. немає