Динаміка морфологічних змін в культурі нейральних клітин з моделлю нейротравми in vitro за впливу кондиційованих середовищ нейрогенних клітин фетального мозку щура / Є. Г. Педаченко [та ін.] // Клітинна та органна трансплантологія. - 2020. - Том 8, N 2. - С. 166-176 MeSH-головна: НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ ТРАВМЫ -- TRAUMA, NERVOUS SYSTEM КЛЕТОК КУЛЬТУРЫ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ -- CELL CULTURE TECHNIQUES IN VITRO МЕТОДЫ -- IN VITRO TECHNIQUES МОДЕЛИ НА ЖИВОТНЫХ -- MODELS, ANIMAL Анотація: Потенційною стратегією відновлення і регенерації ушкоджень головного мозку внаслідок черепно-мозкової травми вважається трансплантація нейрогенних стовбурових та/або прогеніторних клітин (НСК/НПК). До ключових чинників регенеративної дії НСК/НПК (bystander-ефектів) відносять продуковані ними в позаклітинне середовище сигнальні молекули - секретом. МЕТА РОБОТИ - встановити вплив кондиційованих середовищ нейрогенних клітин фетального мозку (НКФМ) щура на моделі нейротравми в культурі нейральних клітин in vitro. МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ. На культурі нейральних клітин з фетального мозку (НКФМ) плодів щурів (Е14-16) моделювали нейротравму in vitro шляхом транссекції моношару та додавали кондиційоване середовище, отримане з 24-год культур НКФМ. Оцінювали фенотип клітин за морфологічними ознаками та шляхом імуноцитохімічного забарвлення на Nestin і GFAP. Порівнювали щільність і довжину відростків, міграційну здатність, щільність моношару у зоні транссекції, швидкість зарощення зони транссекції. Морфометричне дослідження включало аналіз ширини зони транссекції, кількості мігруючих клітин, дистанції їх міграції та мітотичної активності в неушкодженій ділянці культури. РЕЗУЛЬТАТИ. За умов стандартного складу поживного середовища (ДМЕМ з 20 % фетальної телячої сироватки, 8 мг/мл глюкози) на відтвореній моделі нейротравми in vitro в зоні транссекції виявили ознаки ендогенного регенеративного процесу вже після 24-48 год культивування (проростання відростків клітин з моношару, міграція одиночних недиференційованих або малодиференційо- ваних клітин на невелику відстань) та його зменшення у наступні 72-96 год спостереження (дегенерація виселених у зону транссекції клітин і відростків). При однократному додаванні після транссекції кондиційованих середовищ від 24-год культур НКФМ щура (концентрація білка 0,1 мг/мл) спостерігали стимуляцію регенеративних процесів у динаміці спостереження до 7-ї доби включно: міграція з моношару відростків клітин одночасно з недиференційованими або малодиференційованими клітинами (через 24 год), формування кластерів клітин та їх диференціювання (через 48 год), моношарові розрощення диференційованих клітин, часткове або повне зарощення терміналей зони транссекції (протягом 72-168 год культивування). Морфологічні ознаки дегенеративних явищ виселених у зону транссекції клітин з’являлись лише на 8-у добу культивування. Кондиційовані середовища не впливали на якісний і кількісний клітинний склад зони росту культури в неушкодженій ділянці, при цьому зберігався середній рівень мітотичної активності клітин. ВИСНОВКИ. Кондиційоване середовище від 24-год культур НКФМ щура здатне стимулювати репаративні процеси на моделі нейротравми в культурі нейральних клітин in vitro протягом не менше 7 діб при однократному додаванні, не впливаючи на клітинний склад та мітотичну активність неушкодженоїділянки культури Дод.точки доступу: Педаченко, Є. Г. Любич, Л. Д. Стайно, Л. П. Єгорова, Д. М. Вільних прим. немає