Порівняння рівнів експресії гена GFP при Agrobacterium-опосередкованій транзієнтній трансформації махорки Nicotiana rustica L. конструкціями з різними промоторними послідовностями [Текст] / О. І. Варченко [та ін.]> // Цитологія і генетика = Cytology and genetics. - 2020. - Т. 54, № 6. - С. 35-44
MeSH-головна: ТАБАК -- TOBACCO (генетика) АГРОБАКТЕРИИ -- AGROBACTERIUM (генетика) ГЕННОЙ ЭКСПРЕССИИ РАСТЕНИЙ РЕГУЛЯЦИЯ -- GENE EXPRESSION REGULATION, PLANT (генетика) ПРОМОТОРНЫЕ УЧАСТКИ ГЕНОВ -- PROMOTER REGIONS, GENETIC (генетика) ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ -- GENETIC ENGINEERING (использование, методы) Анотація: Промотори – це ключові елементи рівня експресії генів, тому їх вибір є важливим етапом в генно-інженерних дослідженнях. Репортерний ген gfp, що кодує зелений флуоресцентний білок (GFP), транзієнтно експресували в листкових тканинах махорки Nicotiana rusticа L. Порівняно з іншими видами роду Nicotiana вона має великий потенціал для експресії гетерологічних білків, велику вегетативну біомасу, легко інфільтрується, і при цьому, є невибагливою при вирощуванні. В роботі використовували шість створених нами генетичних конструкцій, які відрізнялися промоторними послідовностями: 35S промотор вірусу мозаїки цвітної капусти – Cauliflower Mosaic Virus (35S CaMV), подвійний 35S промотор (D35S CaMV), промотори генів RbcS1B та RbcS2B, що кодують малу субодиницю рибулозобісфосфаткарбоксилази (Rubisco), виділених з різушки Таля (Arabidopsis thaliana (L.) Heynh.), та промотори генів LHB1B1 та LHB1B2 з A. thaliana, що кодують хлорофіл a-b зв’язуючі білки. Експресію гена gfp детектували на 7 день після інфільтрації візуально, спектрофлуориметрично та за білковим вмістом (метод Бредфорда). Найвищий рівень експресії спостері-гали при використанні подвійного 35S промотору (D35S CaMV), а найнижчий – при використанні промотору гена LHB1B1 Дод.точки доступу: Варченко, О. І. Кучук, М. В. Парій, М. Ф. Симоненко, Ю. В.
Вільних прим. немає
|