Форма документа : Стаття із журналу Шифр видання : Автор(и) : Galkin O.Yu., Komar A. G., Besarab O. B. Назва : Different mice inbred strains humoral immune response against human prostate-specific antigen Паралельн. назви :Гуморальна імунна відповідь мишей різних інбредних ліній на простатичний специфічний антиген людини Місце публікування : The Ukrainian Biochemical Journal. - 2019. - Т. 91, № 1. - С. 30-37 (Шифр УУ60/2019/91/1) Примітки : Bibliogr. at the end of the art. MeSH-головна: БОЛЕЗНЬ, МОДЕЛИ НА ЖИВОТНЫХ -- DISEASE MODELS, ANIMAL КРЫСЫ ИНБРЕДНЫХ ЛИНИЙ -- RATS, INBRED STRAINS ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ СПЕЦИФИЧЕСКИЙ АНТИГЕН -- PROSTATE-SPECIFIC ANTIGEN АНТИТЕЛ ОБРАЗОВАНИЕ -- ANTIBODY FORMATION ИММУНИТЕТ ГУМОРАЛЬНЫЙ -- IMMUNITY, HUMORAL Анотація: The aim of the study was an investigation of humoral immune response to prostate-specific antigen (PSA) of different mice inbred strains for further development of recommendations for appropriate immunization schemes for monoclonal antibodies (McAbs) obtaining. The study was conducted using: Balb/c and NZB mice; PSA from human sperm (as immunogen). In case of booster immunization immunogen was previously diluted to the desired concentration (10 or 30 µg per 100 µl) in saline, and injected in the tail vein or intraperitoneally. In case of other immunizations, we prepared emulsion solution of immunogen with adjuvant to final concentration of 10 or 30 µg per 100 µl: PSA was dissolved in saline, the same volume of adjuvant was added, and mixture was thoroughly mixed to form a stable emulsion. When subcutaneous administration, total dose of 100 µl was divided into two equal parts and injected in the hind paw of mice. Intraperitoneal immunization was performed by single administration of 100 µl of emulsion. The level of specific antibodies was determined by titration of blood sera from animals in indirect ELISA. Series of experiments were conducted to determine the level of humoral response of mice of different inbred strains (Balb/c and NZB) for multi-stage immunization with different duration with different amounts of PSA (10 and 30 μg), with different immunoglobulin administration (intraperitoneal and subcutaneously), and with different adjuvants (Freund’s complete and incomplete adjuvants, FCA/FIA). Final booster immunization at a dose of 30 μg was performed either in the same manner as the previous administration of the immunogen, or intravenously in the physio­logical saline solution. Dependencies of the humoral immune response of Balb/c and NZB mice against PSA on the route of administration of immunogen, the dose and duration of immunization were established. It was shown that intraperitoneal administration provided formation of higher titers of specific antibodies in case of both mice strains. Balb/c mice lines more rapidly responded to PSA, than an NZB mice (for all investigated schemes immunization). It was shown that the most effective immunization scheme was three times intraperitoneal administration with 10 µg of PSA for 8 weeks (the first immunization with FCA, and the rest – with FIA) and booster immunogen intravenous administration in saline solutionМетою дослідження було вивчення гуморальної імунної відповіді на простатичний специфічний антиген (ПСА) для різних типів інбредних ліній мишей з подальшим формуванням рекомендацій щодо відповідних схем імунізації для одержання моноклональних антитіл (МкАт). Дослідження проводили з використанням мишей ліній Balb/c та NZB; ПСА із сперми людини (як імуноген). У разі бустер-імунізацій імуноген попередньо розводили до потрібної концентрації (10 або 30 мкг на 100 мкл) у фізіологічному розчині та вводили у хвостову вену або внутрішньочеревно. За іншої імунізації готували емульсійний розчин імуногену з ад’ювантом до кінцевої концентрації 10 або 30 мкг на 100 мкл: ПСА розчиняли у фізіологічному розчині, додавали такий самий об’єм ад’юванта, і суміш ретельно змішували, щоб утворити стабільну емульсію. Загальну дозу 100 мкл поділяли на дві рівні частини і вводили підшкірно в задні лапи мишей. Імунізація проводилася шляхом одноразового в/ч введення 100 мкл емульсії. Рівень специфічних антитіл визначали титруванням сироватки крові тварин за допомогою непрямого імуноензиматичного аналізу. Проведено серію експериментів для визначення рівня гуморальної відповіді мишей за багатоступеневої імунізації різної тривалості з ПСА (10 і 30 мкг), за внутрішньочеревного введення імуногену та підшкірно з різними ад’ювантами (повний та неповний ад’юванти Фрейнда, ПАФ/НАФ). Остаточну бустерну імунізацію в дозі 30 мкг проводили або способом попереднього введення імуногену, або внутрішньовенно у фізіологічному розчині. Встановлено закономірності гуморальної імунної відповіді мишей на ПСА залежно від шляху­ введення імуногену, його дози та тривалості імунізації. Доведено, що внутрішньочеревне введення забезпечує утворення вищих титрів специфічних антитіл для обох досліджуваних ліній мишей. Миші лінії Balb/c інтенсивніше відповідають на ПСА, ніж миші лінії NZB (для всіх досліджених схем імунізації). Показано, що найефективнішою є схема імунізації з трикратним внутрішньочеревним введенням 10 мкг ПСА впродовж 8 тижнів (перше введення – із ПАФ, решта – із НАФ) та бустер-введенням імуногену внутрішньовенно у фізіологічному розчині Дод.точки доступу: Komar, A. G. Besarab, O. B.