Форма документа : Стаття із журналу Шифр видання : Автор(и) : Білинська О. В. Назва : Вплив попередньої обробки колосся за низької температури на ефективність отримання гаплоїдів ярого ячменю у культурі пиляків in vitro Паралельн. назви :Influence of Spike Pretreatment at Low Temperatures on Efficiency of Spring Barley Haploid Production in Anthe Culture in Vitro Місце публікування : Проблеми кріобіології і кріомедицини. - Харків, 2020. - Т. 30, № 1. - С. 68-76 (Шифр ПУ73/2020/30/1) MeSH-головна: ЯЧМЕНЬ -- HORDEOLUM КОНСЕРВИРОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЕ -- PRESERVATION, BIOLOGICAL IN VITRO МЕТОДЫ -- IN VITRO TECHNIQUES Анотація: Попередня обробка колосся за низької температури перед вилученням та інокуляцією пиляків на живильне середовище є важливим елементом технологій отримання гаплоїдів багатьох видів вищих рослин. Вказана процедура не лише сприяє подовженню оптимальної фази розвитку мікроспор, а й стимулює їх аномальний багаторазовий поділ із утворенням калюсу, ем-бріоїдів і підвищує частоту регенерації рослин. Досліджено вплив тривалості та способу попередньої обробки колосся, генотипу та складу живильного середовища на ефективність утворення морфогенних структур і регенерацію рослин у культурі пиляків in vitro ярого ячменю. Температурному впливу 4ºС піддавали зрізані пагони двох сортів і лінії ярого ячменю протягом 5 діб (контроль) та ізольоване колосся протягом 28 діб. Асептично видалені пиляки культивували на живильних середовищах, які містили солі макро- і мікроелементів відповідно до прописів N6 та MS, фізіологічно активні речовини, мальтозу та різнилися гелеутворюючими компонентами, (агар-агар або хімічно модифікований крохмаль Д5а-М) у оптимальних для гелеутворення концентраціях. Встанов-лено перевагу попередньої обробки ізольованого колосся за температури 4ºС тривалістю 28 діб порівняно із зберіганням пагонів після 5-добової експозиції та доцільність застосування у складі живильного середовища крохмалю замість агар-агару. У лінії ДГ00-126 із генетично детермінованою високою здатністю до андрогенезу in vitro за поєднання цих методичних підходів частота регенерації нормально пігментованих рослин зросла з 23,4 до 100%.The spike pretreatment at low temperatures before isolating and inoculating anthers in a nutrient medium is an important element of technology for producing haploids of many species of higher plants. This procedure not only extends the optimal stage duration of microspores’ development, but stimulates their abnormal multiple division with formation of callus, embryoids and increases the frequency of plant regeneration. Here, we have studied the impact of the duration and the mode of spike pre-treatment, genotype and gel-forming component of nutrient medium on the effi ciency of morphogenic structure formation and plant regeneration in spring barley in vitro anther cultures. The cut tillers of two varieties and lines and the isolated spikes were kept at 4ºC for 5 (the control) and 28 days, respectively. The aseptically isolated anthers were cultured in nutrient media, contained salts of macro- and microelements according to the N6 and MS formulations, physiologically active substances, maltose, and differed by gel-forming components (agar or chemically modifi ed starch D5a-M) at the optimal concentrations for gel formation. The advantage of isolated spike pretreatment at 4°C within 28 days versus the tiller storage after a 5-day exposure and the expediency to use starch instead of agar within the nutrient medium, have been established. The combination of these methodical approaches resulted in an increase in the frequency of green plant regeneration in line DH00-126 with a genetically determined high capability to in vitro androgenesis from 23.4 up to 100% |