Onoiko, O. B. Influence of sulfite on ATPase activity of coupling factor CF[[d]]1[[/d]] isolated from spinach chloroplasts [Текст] = Вплив сульфіту на АТPазну активність чинника спряження CF[[d]]1[[/d]], ізольованого із хлоропластів шпинату / O. B. Onoiko, A. P. Khomochkin, O. K. Zolotareva // The Ukrainian Biochemical Journal. - 2019. - Т. 91, № 1. - С. 47-52. - Bibliogr. at the end of the art. MeSH-главная: ХЛОРОПЛАСТЫ -- CHLOROPLASTS (ультраструктура, химия) ШПИНАТ ОГОРОДНЫЙ -- SPINACIA OLERACEA (воздействие облучения, рост и развитие) АРИЛСУЛЬФАТАЗЫ -- ARYLSULFATASES (анализ, химический синтез) БИОХИМИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ -- BIOCHEMICAL PROCESSES Аннотация: The present study of sulfite participation in the regulation of the chloroplast ATP-synthase complex can help to understand the mechanisms of acid rains toxic effects on the plant photosynthetic apparatus. The aim of the work was to study the effect of sulfite on Ca[[p]]2+[[/p]]– and Mg[[p]]2+[[/p]]-dependent ATP hydrolysis catalysed by coupling factor CF[[d]]1[[/d]], exposed to preliminary short-term acid treatment. CF[[d]]1[[/d]] was isolated from spinach chloroplasts (Spinacia oleracea L.). The latent ATPase activity of CF[[d]]1[[/d]] was activated by sodium sulfite addition into incubation media. The rate of ATP hydrolysis was determined by the release of inorganic phosphate. In the presence of 25 mM exogenous sulfite the Mg[[p]]2+[[/p]]-dependent hydrolytic activity of CF[[d]]1[[/d]] was increased 7-fold and Ca[[p]]2+[[/p]]-dependent activity 3-fold compared to the control. Carbonic anhydrase inhibitors acetazolamide or ethoxyzolamide eliminated sulfite-induced stimulation of ATP hydrolysis. The sulfite stimulating effect on Ca[[p]]2+[[/p]]– and Mg[[p]]2+[[/p]]-ATPase activity was increased dramatically after incubation (5 min) of isolated CF[[d]]1[[/d]] in a medium with pH 3.5 and its subsequent transition to the alkali medium (pH 8.0). In this case, 1 mM sulfite-induced a 10-fold acceleration of ATP hydrolysis. Carbonic anhydrase specific inhibitors (50 μM) removed the sulfite effect. These data suggest that sulfite was able to replace bicarbonate in the CF[[d]]1[[/d]] structure after the release of bound HCO[[d]]3[[/d]]– during acid treatment Проведені дослідження з розкриття механізмів участі сульфіту в регуляції АТР-синтазного комплексу хлоропластів є актуальними з огляду впливу кислотних дощів на фотосинтетичний апарат рослин. Метою роботи було вивчення дії сульфіту на Ca[[p]]2+[[/p]]– і Mg[[p]]2+[[/p]]-залежний гідроліз АТР чинником спряження CF[[d]]1[[/d]] із хлоропластів шпинату, які піддавали попередній кислотній інкубації. CF[[d]]1 [[/d]]ізолювали із хлоропластів шпинату (Spinacia oleracea L.). Латентну (приховану) АТРазну активність CF[[d]]1[[/d]] активували додаванням у середовище сульфіту натрію. Швидкість гідролізу АТР визначали за звільненням неорганічного фосфату. За наявності 25 мМ екзогенного сульфіту Mg[[p]]2+[[/p]]-залежна гідролітична активність CF[[d]]1[[/d]] зростала у 7 разів, а Ca[[p]]2+[[/p]]-залежна – у 3 рази порівняно з контролем. Інгібітори карбоангідрази ацетазоламід або етоксизоламід усували стимуляцію гідролізу АТР сульфітом. Спричинена сульфітом стимуляція Ca[[p]]2+[[/p]]– і Mg[[p]]2+[[/p]]-АТРазної активності значно посилювалась після інкубації (5 хв) ізольованого CF[[d]]1[[/d]] за рН 3,5 із наступним переведенням у середовище з рН 8,0. За таких умов 1 мМ сульфіт спричиняв 10-кратне прискорення гідролізу АТР. Специфічні інгібітори карбоангідраз (50 мкМ) знімали стимулювальний ефект сульфіту. Одержані дані дозволяють припустити, що сульфіт здатен заміщувати бікарбонат у структурі CF[[d]]1[[/d]] після вивільнення зв’язаного НСО[[d]]3[[/d]]– внаслідок кислотної інкубації Доп.точки доступа: Khomochkin, A. P. Zolotareva, O. K. Свободных экз. нет |