Isolation of antimicrobials from native plants of taif governorate / M. El-Sheham Ahmed [et al.] // Цитология и генетика. - 2019. - Том 53, N 3. - P75-77 MeSH-главная: ДЕФЕНСИНЫ -- DEFENSINS (биосинтез, генетика) АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ СРЕДСТВА -- ANTI-BACTERIAL AGENTS (биосинтез, выделение и очистка) ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ С ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПТАЗОЙ -- REVERSE TRANSCRIPTASE POLYMERASE CHAIN REACTION (использование) Аннотация: Plant defensins are subgroup of plant antimicrobial peptides that have high potentials in developing safe natural agricultural and pharmaceutical biocontrol products as alternatives for the current chemical pesticides, insecticides, and antibiotics. In this study, the level of defensin gene expression was evaluated in floral buds of 9 native plants from Saudi Arabia environment using reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR). As defensins are highly expressed at the mRNA level in Ochradenus baccatus (Ob), it was used for the isolation of defensin peptides using ion exchange chromatography followed by gel filtration using Sephadex G50. SDS-PAGE of ion exchange purified proteins detected several bands in a range of 2–10 kD. These proteins were separated by gel filtration using Sephadex G50. The resultant peptide of 5kD showed an antimicrobial activity. The peptide inhibited Gram positive and Gram negative bacteria with IC[[d]]50[[/d]] ranged from 10 to 25 µg/mL. It also inhibited 25 to 60 % of fungal linear growth at concentrations of 12.5 and 25 µg/ mL. The present results demonstrate that, we could separate and purify a 5 kD peptide from Ob. This peptide could be utilized to develop natural antimicrobial products Дефенсини рослин – це підгрупа рослинних антимікробних пептидів з високим потенціалом для розвитку безпечних природних сільськогосподарських та фармацевтичних продуктів для біоконтролю як альтернативи наявним хімічним пестицидам, інсектицидам та антибіотикам. Полімеразно-ланцюгова реакція з використанням зворотної транскрипції (ПЛР-ЗТ) була використана у цьому дослідженні з метою проведення оцінки рівня експресії генів дефенсинів рослин у бутонах квітів 9 аборигенних рослин з Саудівської Аравії. Оскільки експресія дефенсинів активно проходить на рівні мРНК в Ochradenus baccatus (Ob), цю рослину було використано для виділення пептидів дефенсинів за допомогою іонообмінної хроматографії з наступною гель-фільтрацією за використання Sephadex G50. ДСН-ПААГ білків, очищених шляхом іонообмінної хроматографії, виявив декілька смужок у діапазоні 2–10 кДа. Ці білки були виділені шляхом гель-фільтрації на Sephadex G50. Виявилось, що отриманий 5 кДа пептид мав антимікробну дію. Він пригнічував грам-позитивні та грам-негативні бактерії, причому концентрація напівмаксимального інгібування (IC[[d]]50[[/d]]) складала від 10 до 25 мкг/мл. Також цей пептид пригнічував від 25 до 60 % лінійного росту грибків при концентрації в 12,5 та 25 мкг/мл. Наші результати демонструють можливість виділення та очищення 5 кДа пептиду з Ob. Цей пептид може бути використаний для розробки антимікробних препаратів Доп.точки доступа: Ahmed, M. El-Shehawi Mohamed, M. Ahmed Mona, M. Elseehy Mohamed, M. Hassan Свободных экз. нет