Вид документа : Статья из журнала Шифр издания : Автор(ы) : Котик О. А., Котлярова А. Б., Марченко С. М. Заглавие : Оптимізація методу ізолювання ядер для електрофізіологічних досліджень іонних каналів ядерної мембрани кардіоміоцитів щура Место публикации : Фізіологічний журнал. - К., 2018. - Том 64, N 2. - С. 26-33 (Шифр ФУ6/2018/64/2) MeSH-главная: ЯДЕРНАЯ ОБОЛОЧКА -- NUCLEAR ENVELOPE ИОННЫЕ КАНАЛЫ -- ION CHANNELS ПЭТЧ-КЛАМП МЕТОДЫ -- PATCH-CLAMP TECHNIQUES МИОЦИТЫ СЕРДЕЧНЫЕ -- MYOCYTES, CARDIAC ЭЛЕКТРОФИЗИОЛОГИЯ -- ELECTROPHYSIOLOGY ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА ЖИВОТНЫХ -- ANIMAL EXPERIMENTATION КРЫСЫ -- RATS Аннотация: Оптимізовано умови ізолювання ядер кардіоміоцитів, придатних для електрофізіологічних досліджень іонних каналів нативної ядерної мембрани. Визначальним критерієм результативності вивчення біофізичних властивостей транспортувальних систем нативної ядерної мембрани є збереження структурної та функціональної інтактності ізольованих ядер. Оцінювання якості отриманих зразків здійснювали, реєструючи іонні струми крізь ядерну мембрану методом patchclamp у конфігурації nucleus-attached або excised patch у режимі фіксації потенціалу. В наших експериментах протестовано розчини різного складу та порівняно якість зразків, отриманих із застосуванням відмінних способів гомогенізації міокарда. Встановлено, що найчастіше зареєструвати активність іонних каналів ядерної мембрани вдавалося за умов ізолювання ядер у розчині такого складу (ммоль/л): цукроза — 300, KCl — 60, HEPES — 10 (pH 7,2) з додаванням суміші інгібіторів протеаз, DL-дитіотриетолу (1 ммоль/л) та гліцерину, застосовуючи скляний гомогенізатор (Dounce). Доп.точки доступа: Котлярова, А. Б. Марченко, С. М. |