Вид документа : Статья из журнала
Шифр издания :
Автор(ы) : Прокопюк О. С., Шевченко М. В., Прокопюк В. Ю., Мусатова І. Б., Сафонов Р. А., Прокопюк О. В.
Заглавие : Виділення та кріоконсервування клітин плацент: пошук ефективних біотехнологій для експериментальної та регенеративної медицини
Параллельн. заглавия :Isolation and Cryopreservation of Placental Cells: Search for Optimal Biotechniques in Experimental and Regenerative Medicine
Место публикации : Проблеми кріобіології і кріомедицини. - Харків, 2021. - Т. 31, № 1. - С. 82-88 (Шифр ПУ73/2021/31/1)
MeSH-главная: КРИОПРЕЗЕРВАЦИЯ -- CRYOPRESERVATION
ПЛАЦЕНТА -- PLACENTA
ЭУКАРИОТЫ -- EUKARYOTA
Аннотация: У роботі проводили виділення стовбурових клітин пульпи (СКП) зародків третіх молярів (зубів мудрості) людини ферментативним методом із використанням колагенази, досліджували їхню морфологію в умовах моношарового культивування, визначали імунофенотип, а також оцінювали проліферативні властивості та диференціювальний потенціал до та після кріоконсервування. Показано, що за морфологічними ознаками, профілем поверхневих маркерів і диференціювальним потенціалом отримані СКП відповідають мультипотентним мезенхімальним стромальним клітинам. Кріоконсервування СКП шляхом повільного охолодження (1 °С / хв) до ‒80°С із подальшим зануренням в рідкий азот у середовищі культивування без кріопротектора призводить до загибелі клітин. Кріоконсервування за тією самою програмою в присутності 10% диметилсульфоксиду (ДМСО) і 20% сироватки дозволяє отримувати СКП із життєздатністю (82 ± 6)%, які виявляють метаболічну і проліферативну активність, а також здатність до спрямованого диференціювання в остео- та адипогенному напрямках на рівні, притаманному клітинам до кріоконсервуванняHigh efficacy of placental cells application necessitates their investigation. Preclinical studies require an improvement of the methods for obtaining, standardizing and storage of placental cells of experimental animals. Cells were isolated from rats and mice placentas by means of different enzymatic methods and the one of explants. Cells were cryopreserved with DMSO in DMEM using two-stage freezing. The number, morphological, cultural, metabolic features of cells were studied after isolation and storage. The maximum number of viable cells from the placentas of mice and rats was found to be obtained using the explant method or trypsin with ETDA. Cell cultures from mice and rats placentas after the third passage had stable morphofunctional characteristics. The viability of warmed rat placental cells according to dye exclusion was (92.3 ± 1.6)%, according to the adhesive test this was (81.3 ± 5.8)%. For mice placental cells, these values were (86.7 ± 3.7)% and (79.2 ± 8.1)%, correspondingly. The research results enabled the determining of effective biotechniques for obtaining the cryopreserved placental cells of rats and mice to perform preclinical studies of their biological effect in models of allo- and autotransplantations
Доп.точки доступа:
Прокопюк, О. С.
Шевченко, М. В.
Прокопюк, В. Ю.
Мусатова, І. Б.
Сафонов, Р. А.
Прокопюк, О. В.