Вид документа : Статья из журнала Шифр издания : Автор(ы) : Skachkova O. V., Gorbach O. I., Inomistova M. V., Garmanchuk L. V., Khranovska N. M. Заглавие : Comparative characteristic of lung cancer stem-like cells generated in vitro under different culture conditions Место публикации : The Ukrainian biochemical journal. - Київ, 2021. - Vol. 93, № 1. - С. 88-95 (Шифр УУ60/2021/93/1) MeSH-главная: НОВООБРАЗОВАНИЙ СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ -- NEOPLASTIC STEM CELLS СФЕРОИДЫ КЛЕТОЧНЫЕ -- SPHEROIDS, CELLULAR КЛЕТКИ КУЛЬТИВИРУЕМЫЕ -- CELLS, CULTURED IN VITRO МЕТОДЫ -- IN VITRO TECHNIQUES ЛЕГКИХ НОВООБРАЗОВАНИЯ -- LUNG NEOPLASMS Аннотация: Cancer stem cells (CSCs) play an important role in resistance to cancer treatment and recurrence developing. The aim of this study was to obtain cell culture of MOR line non-small cell lung cancer cells enriched in CSCs and to investigate its functional and molecular-genetic properties. Tumor spheroids (TS) of MOR cell line were generated in vitro under normal adhesive (0.2% carboxymethyl cellulose, CMC) or low-adhesive (2% agarose) culture conditions. Lateral population of TS was evaluated by flow cytometry with the use of R-123 fluorescent dye, the index of R-123 exclusion was also assessed. Expression of CD44, ALDHA1, CD133, Sox2 and Nanog mRNA was determined with RT-qPCR. It was found that regardless of the culture conditions tumor spheroids form a lateral population characterized by an increased dye exclusion index. Expression levels of CD44, ALDHA1, CD133, Sox2 and Nanog mRNA in TS cells obtained under low-adhesive (2% agarose) conditions were significantly higher than in monolayer cells and cells obtained using 0.2% CMC. Thus, the proposed method of culturing in low-adhesive conditions allowed to enrich significantly tumor spheroids of MOR line in cells with CSC propertiesРакові cтовбурові клітини (СSCs) відіграють важливу роль у стійкості за лікування раку та розвитку рецидивів. Мета роботи – отримати збагачену на СSCs культуру клітин лінії MOR недрібноклітинного раку легені та дослідити її функціональні та молекулярно-генетичні властивості. Пухлинні сфероїди (ПС) лінії MOR генерували in vitro в стандарт­них (з додаванням 0,2% карбоксиметилцелюлози, СМС) або низькоадгезивних (з 2-им% розчином агарози) умовах культивування. Бокові популяції ПС досліджували методом протокової цитофлуориметрії з використанням флуоресцентного барвника R-123, також оцінювали індекс виключення R-123 із клітин. Рівень експресії мРНК генів CD44, ALDHA1, CD133, Sox2 та Nanog визначали методом кількісної ПЛР у режимі реального часу. Встановлено, що незалежно від умов культивування ПС утворювали бокову популяцію зі збільшеним індексом виключення R-123. Виявлено, що рівень експресії мРНК CD44, ALDHA1, CD133, Sox2 та Nanog у ПС лінії MOR, отриманих за низькоадгезивних умов (2% агарози) вірогідно перевищує відповідні показники в клітинах моношару та клітинах, отриманих за використання 0,2% СМС. Отже, запропонований метод культивування ПС недрібноклітинного раку легені MOR у низькоадгезивному середовищі дозволяє досягти максимального збагачення на клітини, що мають властивості CSC Доп.точки доступа: Skachkova, O. V. Gorbach, O. I. Inomistova, M. V. Garmanchuk, L. V. Khranovska, N. M.